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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)單，其實(shí)不然。記得以前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗(yàn)，跟我說(shuō)，ELISA實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)直太簡(jiǎn)單了，到第2次在次做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，他驚訝了，說(shuō)結(jié)果差別怎么這么大（同一份標(biāo)本），第三次的時(shí)候，他決定認(rèn)真的做一次，爭(zhēng)取做到同一份標(biāo)本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)單，發(fā)覺(jué)其實(shí)挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實(shí)驗(yàn)中的小技巧，希望對(duì)大家有所幫助！1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、...

ELISA實(shí)驗(yàn)是我們大家最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn),也是比較容易出問(wèn)題的實(shí)驗(yàn),可能你一不小心,你的整個(gè)實(shí)驗(yàn)便是無(wú)功能重來(lái)那!所以小編給您講解在使用ELISA試劑盒做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有些細(xì)節(jié)若是做不好會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)異常，或者效果不佳，那么你有想過(guò)是什么原因嗎？一、白板異常：顯色步驟結(jié)束后，酶標(biāo)板所有孔均無(wú)顏色。陽(yáng)性對(duì)照不顯色。1.試劑已過(guò)效期，或不同試劑盒組分混用（解決方式：檢查試劑的組分及批號(hào)，確認(rèn)未過(guò)期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用）。2.錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯...

POD測(cè)試盒是一款能夠?qū)σ苿?dòng)設(shè)備進(jìn)行端對(duì)端測(cè)試的工具，它的出現(xiàn)引起了許多人的關(guān)注。那么，為什么POD測(cè)試盒成為了測(cè)試領(lǐng)域的新寵兒呢？一、口碑好在測(cè)試領(lǐng)域，此測(cè)試盒的口碑是相當(dāng)不錯(cuò)的。在網(wǎng)上的評(píng)論區(qū)里，可以看到很多用戶(hù)對(duì)POD測(cè)試盒的好評(píng)，他們認(rèn)為POD測(cè)試盒不僅功能強(qiáng)大、易于使用，而且成本低廉。這些優(yōu)點(diǎn)讓POD測(cè)試盒得到了越來(lái)越多人的青睞。二、功能全此測(cè)試盒是一款功能非常全面的測(cè)試工具，它能夠?qū)σ苿?dòng)端從前端到后端的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行測(cè)試，并且可以用于各種類(lèi)型的測(cè)試，例如自動(dòng)化測(cè)試、...

在ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中時(shí)常會(huì)出現(xiàn)復(fù)測(cè)現(xiàn)象即我們時(shí)常說(shuō)的"花板"現(xiàn)象，這種現(xiàn)象影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確判讀，對(duì)工作造成一定的不利影響，一旦出現(xiàn)“花板"，實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄，重新進(jìn)行，不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間，而且還會(huì)出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問(wèn)題。影響因素分析如下：一、標(biāo)本因素正確處理標(biāo)本，防止大規(guī)模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭，防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測(cè)，但血清的分離應(yīng)在抽血后等血液wan全凝固后再離心。二、試劑因素正確保存及使用有效試劑。使用過(guò)期試劑及...

在分子生物學(xué)和基因研究領(lǐng)域，質(zhì)量和濃度是DNA和RNA樣本分析的重要參數(shù)。因此，為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，并且避免一些不必要的錯(cuò)誤或偏差，研究人員需要進(jìn)行DNA和RNA樣本的準(zhǔn)確測(cè)定和質(zhì)量控制。其中，POD（Picodrop）測(cè)試盒是一種簡(jiǎn)單易用、高靈敏度和高精度的測(cè)試工具。測(cè)試盒是一種基于端光學(xué)技術(shù)的微量樣品測(cè)試系統(tǒng)，可以快速、準(zhǔn)確地測(cè)定DNA和RNA樣品的質(zhì)量和濃度。其特色在于，它使用一種先進(jìn)的平板式窄視角水滴成像技術(shù)，可以測(cè)定樣品體積范圍在0.5-2μL之間，濃...

大分子抗原因其具有兩個(gè)以上的抗原決定簇，而可用雙抗體夾心法測(cè)定，小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3，T4及睪酮等激素因其只有一個(gè)抗原決定簇，從而無(wú)法使用雙抗夾心方法測(cè)定，只能采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法測(cè)定。具體步驟如下：1．先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2．同時(shí)加入待測(cè)樣本和酶標(biāo)的小分子，溫育一定時(shí)間后洗板；此步中，待測(cè)樣本的小分子將與酶標(biāo)小分子競(jìng)爭(zhēng)與固相上特異抗體結(jié)合。3．加入酶底物，溫育顯色測(cè)定，顯色的強(qiáng)弱與待測(cè)樣本中的小分子含量成反比。這種測(cè)定模式...

ELISA測(cè)定的陽(yáng)性判斷值,通常是將大量陰性和陽(yáng)性人群的測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后確定的,其確定依據(jù)為判斷結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性率低。在陽(yáng)性判斷值周?chē)欢ǚ秶鷥?nèi)之外的測(cè)定結(jié)果可歸為可疑,亦即ELISA測(cè)定的“灰區(qū)"?！盎覅^(qū)"的大小可用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定。測(cè)定結(jié)果處于“灰區(qū)"的樣本,可通過(guò)確認(rèn)試驗(yàn)或追蹤檢測(cè)來(lái)確定到底是陽(yáng)性還是陰性ELISA“灰區(qū)"是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念?；覅^(qū)的設(shè)置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內(nèi)C(一般在15%～2...

每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對(duì)應(yīng)的說(shuō)明書(shū)，而每一份說(shuō)明書(shū)里都會(huì)有寫(xiě)樣本和稀釋液的稀釋比例，為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中，將為您分析：為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需要稀釋?在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋?zhuān)坑袃蓚€(gè)原因：1）競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物；2）以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。血清稀釋用普通的PBS即可，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底，當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺(jué)得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競(jìng)爭(zhēng)還是...

在ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。...

熒光定量PCR試劑盒的操作步驟：1、取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。3、RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10...